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Ethidium Homodimer 1 (EthD-1)

產(chǎn)品信息

EthD-1（熒光探針與細(xì)胞染色）EthD-1（熒光探針與細(xì)胞染色）

產(chǎn)品描述

Ethidium Homodimer-1 (EthD-1)是一種高親和性的熒光核酸染料，與DNA或RNA結(jié)合后，可以使熒光增強(qiáng)30多倍。Ethidium Homodimer-1(EthD-1)帶有較強(qiáng)正電荷，所以該染料不能穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)行活細(xì)胞染色。但是EthD-1可以準(zhǔn)確的檢測(cè)溶液中的核酸或者解體細(xì)胞中的核酸，是一種較靈敏的核酸染色劑。

產(chǎn)品屬性

CAS號(hào)：61926-22-5
分子式：C44H50Cl6N10
分子量：931.65

λEx/λEm： 528/617 nm(結(jié)合DNA)
λEx/λEm： 493 nm(未結(jié)合DNA)

外觀：紅色固體

溶解性：可溶于DMSO和MeOH
存儲(chǔ)條件：4℃ 避光保存，1年效期

注意事項(xiàng)

用途：本品僅供科研，不得用于其它用途

為了您的an全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

溴乙啡錠二聚體1（Ethidium Homodimer 1, EthD-1）是一種高親和性的熒光核酸染料，結(jié)合ssDNA、dsDNA、RNA、寡核苷酸和三螺旋DNA。EthD-1自身熒光很弱，一旦與DNA結(jié)合后熒光明顯增強(qiáng)（＞30倍），發(fā)明亮的紅色熒光（最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)約528/617nm）。由于EthD-1攜帶強(qiáng)正電荷，不能穿透完整/活細(xì)胞膜，因此，能用來(lái)測(cè)定細(xì)胞活力。基于以上特性，EthD-1可與鈣黃綠素AM（Calcein AM，貨號(hào)：MX3011-50UG）聯(lián)合使用，分別染色死細(xì)胞和活細(xì)胞，從而判斷細(xì)胞活力和毒性。

EthD-1在所有細(xì)胞類(lèi)型（包括哺乳動(dòng)物、細(xì)菌和酵母菌）都是死細(xì)胞特異染料。

外觀：紅色至深紅色固體

熒光特征：EX/Em=528/617nm（TE buffer，與核酸結(jié)合）；EX=493nm（H2O，未與核酸結(jié)合）

溶解性：溶于DMSO（2mM）、甲醇.

化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

使用方法（【注】:我司整理出的使用方法適用于大多數(shù)細(xì)胞。但不同的細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞密度、 不同的培養(yǎng)條件以及其他一些因素都有可能影響染色效果，建議查閱相關(guān)文件，本說(shuō)明僅供參考?。?/span>

儲(chǔ)存液的制備 ：

1) 取適量DMSO加入到 EthD-1中， 配制成2 mM儲(chǔ)液，該儲(chǔ)存液可存于-20℃穩(wěn)定保存一年。

2) 將20 μl2 mM儲(chǔ)液加入到10 ml無(wú)菌的組織培養(yǎng)級(jí)別的D-PBS中， 充分渦旋混勻，使其終濃度為 4μM（推薦濃度為0.1-10 μM，不同細(xì)胞系建議梯度設(shè)置確定最佳染色濃度） 。

3) 吸取上述配置好的工作液 100-150 μl 加入到細(xì)胞蓋玻片上使其*覆蓋。孵育最好是在含有蓋子的盤(pán)子里防止染色液揮發(fā)。

4) 室溫孵育30-45 min，若染色液濃度過(guò)高或溫度過(guò)低可適當(dāng)減少孵育時(shí)間。

5) 向一個(gè)新的顯微鏡載玻片上加入10 μl D-PBS。

6) 使用尖鑷子小心且迅速將載有細(xì)胞的蓋玻片倒置加在含有 D-PBS 的載玻片上， 為了防止染色液揮發(fā)，用干凈透明的指甲油封住載玻片四周。

注意事項(xiàng)

1）熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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